تعريف فيروس موزاييك الخس بالطرق البيولوجية والسيرولوجية والجزيئية من نباتات خس مصابة حقلياً في المملكة العربية السعودية

Abstract

شوهدت أعراض موزاييك على نباتات خس (Lactuca sativa linn.) في حقول الحاير بمنطقة الرياض. تم استخدام اختبار الإليزا للكشف عن وجود المسبب الفيروسي المتسبب في حدوث هذه الأعراض وذلك باستخدام أمصال لعدة فيروسات يشك في تسببها في تكشف هذه الأعراض. تفاعلت الأجسام المضادة الخاصة بفيروس موزاييك الخس إيجابياً في اختبار الإليزا، بينما لم تشاهد أي تفاعلات مصلية للفيروسات الأخرى التي تصيب الخس والتي شملت فيروس موزاييك البرسيم (AMV)، وفيروس موزاييك الخيار (CMV)، وفيروس موزاييك اللفت (TuMV)، وفيروس تبقع وذبول الطماطم (TSWV). تكشفت أعراض على نباتات الخس L. Sativa، والمخلدة<br>Gomphrena globosa، ونوعان من الزريح Chenopodium amaranticolor Coste & Reyn، و C. quinoa التي أعديت ميكانيكياً بعصارة من أوراق الخس التي شوهدت عليها الأعراض. لم تظهر أعراض على نوعي التبغ Nicotiana glutinosa و N. tabaccum عند إعدائهما بعصارة خام من نفس أوراق نبات الخس المصاب بالفيروس. استخدم اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل العكسي النسخ (RT-PCR) للكشف عن الفيروس وتعريفه من مستخلص الحمض النووي الريبوزي لنباتات خس مصابة وذلك باستخدام بادئ متخصص للكشف عن المنطقة "2" التي تشتمل على بداية الطرف 5 لجين الغلاف البروتيني بالإضافة إلى الطرف 3 لجين الأجسام المحتواة النووية من النوع B (Nib). قدر الحمض النووي (DNA) الناتج من تفاعل الــ RT-PCR المضاعف بما يعادل 346 زوجاً من القواعد النيوكليوتيدية وذلك باستخدام الفصل الكهربائي على الأجاروز. تم تنقية قطعة DNA لعزلة فيروس موزاييك الخس التي حجمها 346 كما تم تحديد التتابع النيوكليوتيدي لها في هذه المنطقة. أوضحت مقارنة تحليل التتابع النيوكليوتيدي أن هناك تماثلاً بنسبة 92.4 إلى 98.8% بين عزلة فيروس موزاييك الخس قيد الدراسة والعزلات التي سجلت في البرازيل وفرنسا والصين وأدران وسلالة AF199 وسلالة E. أوضحت نتائج التتابع النيوكليوتيدي أن التماثل بين عزلة السعودية والعزلات المذكورة أعلاه كان متقارباً جداً. يعتبر هذا أول تسجيل لفيروس موزاييك الخس في المملكة العربية السعودية.<br>